測定意義:羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子,造成細胞結(jié)構(gòu)和功能受損,進而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。
測定原理:H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,將鄰二氮菲- Fe2+水溶液中Fe2+氧化為Fe3+ ,導(dǎo)致536nm吸光度下降,樣品對536nm吸光度下降速率的抑制程度,反映了樣品清除羥自由基的能力。
需要的儀器,耗材:恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板和蒸餾水。
樣本處理
1、組織樣本的制備:稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿;10000g 4℃離心 10min,取上清, 置冰上待測。
2、血清、果汁等液體樣本可直接測定。
3、提取物(或者藥物)可配制成一定濃度,如 5mg/mL。